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产品详情

亲和层析填料mRNA

产品详细介绍

mRNA亲和层析填料

mRNA分子含有一个聚腺苷酸尾巴(PolyA 尾巴),长度可达250碱基。dT(25)亲和层析填料表面的dT25基团能与mRNAPolyA尾巴之间通过氢键形成稳定的碱基对,从而以最简单有效的方法捕获mRNA

dT(25) 亲和层析填料

产品参数:

基质:

交联聚(苯乙烯-二乙烯基苯)微球

平均粒径:

50 µm

配体:

dT25-mer

配体密度:

0.3 µmol   dT/mL填料

结合能力:

≈2   mg mRNA / mL填料

结合条件:

0.5–1   M盐,常用缓冲液,中性pH

洗脱条件:

低盐,常用缓冲液,中性pH

最高压力:

7 MPa

热稳定性:

如果需要,可在65°C下使样品变性

化学稳定性:

所有常用缓冲液,1M醋酸,1M盐酸,100%乙醇、IPA等常用有机溶剂;避免接触强氧化剂。

保存缓冲液:

20%乙醇

CIP溶剂

0.1-0.5M   NaOH

产品特色:

Ø   简化工艺流程,有助于最大程度地提高纯化效率,降低后续精纯步骤的复杂性;

Ø   可线性放大性;

Ø   特异性结合mRNA   Poly(A)尾巴,易于从粗转录混合物中纯化mRNA,以有效去除质粒DNA和其他成分;

Ø   生产工艺稳定,无动物源成分。

Ø   性能测评-载量及回收率测试

Ø   测试方法:

层析柱

1ml 预装柱

层析系统

AKTA purifier10

平衡缓冲液

10 mM Tris-HCl, 0.5 M NaCl, 1   mM EDTA, pH 7.4

洗涤缓冲液

10 mM Tris-HCl, 300 mM NaCl, 1   mM EDTA, pH 7.4

洗脱缓冲液

10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH   7.4

再生

纯水

CIP

0.1M NaOH

样品

mRNA

流速

1ml/min


测试结果:( dT25亲和层析填料与两款商品化 dT亲和填料)

性能测评-产品批次稳定性

测试方法:5个不同批次dT(25)亲和层析填料装柱后,在HPLC上进行mRNA进样洗脱程序,比较色谱图与洗脱峰峰面积。

5批次色谱图叠加