mRNA亲和层析填料
mRNA分子含有一个聚腺苷酸尾巴(PolyA 尾巴),长度可达250碱基。dT(25)亲和层析填料表面的dT25基团能与mRNA的PolyA尾巴之间通过氢键形成稳定的碱基对,从而以最简单有效的方法捕获mRNA。

dT(25) 亲和层析填料
产品参数:
基质: | 交联聚(苯乙烯-二乙烯基苯)微球 |
平均粒径: | 50 µm |
配体: | dT25-mer |
配体密度: | 0.3 µmol dT/mL填料 |
结合能力: | ≈2 mg mRNA / mL填料 |
结合条件: | 0.5–1 M盐,常用缓冲液,中性pH |
洗脱条件: | 低盐,常用缓冲液,中性pH |
最高压力: | 7 MPa |
热稳定性: | 如果需要,可在65°C下使样品变性 |
化学稳定性: | 所有常用缓冲液,1M醋酸,1M盐酸,100%乙醇、IPA等常用有机溶剂;避免接触强氧化剂。 |
保存缓冲液: | 20%乙醇 |
CIP溶剂 | 0.1-0.5M NaOH |
产品特色:
Ø 简化工艺流程,有助于最大程度地提高纯化效率,降低后续精纯步骤的复杂性;
Ø 可线性放大性;
Ø 特异性结合mRNA Poly(A)尾巴,易于从粗转录混合物中纯化mRNA,以有效去除质粒DNA和其他成分;
Ø 生产工艺稳定,无动物源成分。
Ø 性能测评-载量及回收率测试
Ø 测试方法:
层析柱 | 1ml 预装柱 |
层析系统 | AKTA purifier10 |
平衡缓冲液 | 10 mM Tris-HCl, 0.5 M NaCl, 1 mM EDTA, pH 7.4 |
洗涤缓冲液 | 10 mM Tris-HCl, 300 mM NaCl, 1 mM EDTA, pH 7.4 |
洗脱缓冲液 | 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.4 |
再生 | 纯水 |
CIP | 0.1M NaOH |
样品 | mRNA |
流速 | 1ml/min |
测试结果:( dT25亲和层析填料与两款商品化 dT亲和填料)

性能测评-产品批次稳定性
测试方法:5个不同批次dT(25)亲和层析填料装柱后,在HPLC上进行mRNA进样洗脱程序,比较色谱图与洗脱峰峰面积。

5批次色谱图叠加